NUÔI CẤY TẾ BÀO UNG THƯ

Xét nghiệm sinh hóaXét nghiệm tiết họcXét nghiệm đông máu - miễn dịchXét nghiệm nước tiểu - vi sinhXét nghiệm di truyền & SHPT
*

*

*

*

*

Nhóm thiết bị làm cho lạnhNhóm thiết bị làm nóngNhóm thứ cơ họcNội thất phòng thí nghiệmCân/pH/Lọc/Pipet/Bơm...

Bạn đang xem: Nuôi cấy tế bào ung thư


Hóa chất cơ bản/phân tíchHóa chất sinh họcSinh phẩm xét nghiệmPipet/Vật tứ tiêu haoHóa chất sinh học phân tử
Các chuyên môn phân tíchCác kỹ thuật đem mẫuPhân một số loại môi trườngCác dự án môi trường xung quanh - chuyển nhượng bàn giao công nghệMôi trường cùng cuộc sống
bacsithai.com

Tế bào Hela là 1 trong những loại tế bào thuộcdòng tế bào bất tửđược thực hiện trong các nghiên cứu khoa học. Đây thuộc dòng tế bào người nhiều năm nhất cùng được thực hiện nhiều nhất. Dòng tế bào này được phân lập từ bỏ tế bào ung thư cổ tử cung ngày 8 tháng hai năm 1951 từ Henrietta Lacks, người mắc bệnh đã qua đời bởi vì ung thư vào ngày 4 tháng 10 năm 1951. Loại tế bào HeLa rất định hình và tăng sinh mạnh mẽ – vấn đề đó dẫn tới việc chúng dễ nhiễm chéo vào nhiều dòng tế bào khác cũng khá được sử dụng trong nghiên cứu.

Các tế bào từ khối u của Lacks được nuôi cấy vày nhà phân tích George Gey mà không tồn tại sự có thể chấp nhận được hay đồng ý của cô ấy, Gey vẫn phát hiện tại ra cách để gia hạn sự sống của chúng ko kể cơ thể. Trước đó, việc nuôi cấy các tế bào khác chỉ hoàn toàn có thể kéo lâu năm trong một vài ngày. Những nhà khoa học đã mất không ít thời gian để thay gắng bảo trì sự sống những tế bào rộng là tiến hành nghiên cứu và phân tích thực tế trên chúng, nhưng một trong những tế bào rước từ khối u của Lacks lại sở hữu sự khác hoàn toàn so với những tế bào khác. George Gey đã có thể phân tách một số tế bào độc nhất vô nhị định, tăng sinh bọn chúng và tạo ra một loại tế bào. Gey để tên mẫu mã tế bào chính là HeLa, theo hai chữ cái đầu trong tên của Henriette Lacks. Chúng đổi thay những tế bào người thứ nhất được nuôi cấy trong phòng nghiên cứu mà gồm sự “bất tử”, nghĩa là bọn chúng không bị tiêu diệt sau một số trong những lần phân chia, với chúng rất có thể được thực hiện cho rất nhiều thí nghiệm. Điều này cho biết thêm lợi ích to bự cho các phân tích sinh học và y khoa.

*

Hình hình ảnh huỳnh quang nhiều photon môi trường thiên nhiên nuôi ghép tế bào Hela cùng với protein huỳnh quang đãng được thêm với thể Golgi (màu da cam), vi ống (màu xanh lá cây) cùng ADN (màu xanh domain authority trời).

Sự tăng sinh ổn định của cái tế bào HeLa chất nhận được một nhà phân tích tại trường đại học của khám đa khoa Minnesota nuôi cấy thành công xuất sắc virus bại liệt, tạo đk cho sự cách tân và phát triển vacxin, và cho năm 1954, Jonas Salk đã cải cách và phát triển một một số loại vacxin phòng căn bệnh bại liệt bằng việc sử dụng những tế bào HeLa. Để demo nghiệm một số loại vacxin mới của Salk, những tế bào được đưa vào sản xuất 1 loạt trong nhà máy sản xuất tế bào đầu tiên.

Năm 1955, tế bào HeLa là tế bào người đầu tiên được nhân chiếc thành công.

Nhu cầu áp dụng tế bào HeLa gia tăng nhanh chóng. Kể từ thời điểm chúng được gửi vào tiếp tế hàng loạt, tế bào HeLa sẽ được những nhà kỹ thuật trên toàn trái đất sử dụng cho “các nghiên cứu và phân tích về ung thư, AIDS, tác động của phóng xạ và những chất bao gồm độc tính, bản đồ gen và vô số những mục đích nghiên cứu và phân tích khác”. Tế bào HeLa được áp dụng để thể nghiệm độ nhạy bén của fan với băng, keo dính, mỹ phẩm với nhiều thành phầm khác. Những nhà khoa học đã nhân được khoảng 20 tấn tế bào HeLa và có khoảng 11,000 văn bằng bản quyền trí tuệ có liên quan đến tế bào HeLa.

1. Lịch sử

Các tế bào được nhân nuôi vày George Otto Gey một thời gian ngắn trước lúc Lacks qua đời vày ung thư năm 1951. Đó được coi là dòng tế bào người thứ nhất được nuôi cấyin vitrothành công, là 1 trong thành tựu công nghệ với những công dụng tương lai sâu rộng lớn trong phân tích y học. Vì tiện ích cho khoa học,Gey hiến tặng ngay các tế bào thuộc với các công cố gắng và các bước mà phòng thử nghiệm của ông đã cải tiến và phát triển cho bất kể nhà kỹ thuật nào yêu cầu. Henriette Lacks và mái ấm gia đình cô ấy được cho phép thu và sử dụng tế bào, nhưng lại tại thời khắc đó, sự cho phép từ gia đình là không phải và cũng không có ai mày mò về sự việc này. Những tế bào về sau đã được thương mại dịch vụ hóa, tuy nhiên chưa khi nào được cấp thủ tục phép chủ yếu thức. Không có yêu ước nào ở thời gian đó cũng như ở lúc này rằng phải thông tin cho người mắc bệnh và tín đồ thân của mình về những sự việc sử dụng tế bào của họ chính vì các vật tư bị loại bỏ hoặc lôi ra trong quá trình phẫu thuật, chẩn đoán hoặc trị liệu đang trở thành gia tài của chưng sĩ hoặc cơ sở y tế (điều này hiện đang đòi hỏi sự gật đầu đồng ý về phương diện đạo đức và sự gật đầu của người bị bệnh ở Anh). Vụ việc này cùng trường thích hợp của Lacks được mang ra tại tandtc Tối cao California khi chúng ta xử vụ án của Moore cùng với Đại diện của trường Đại học California. Tòa án quyết định chính thức rằng phần mô với tế bào loại bỏ đi của một fan không thuộc sở hữu của chúng ta nữa và hoàn toàn có thể được dịch vụ thương mại hóa.

Lúc đầu, bạn ta đặt tên cái tế bào là “Helen Lane” hoặc “Helen Larson” cùng với mục đích đảm bảo danh tính của Lacks. Bỏ mặc nỗ lực đó, thương hiệu thật của cô ấy ấy đã đượcbáo chí sử dụng trong vòng vài năm sau khoản thời gian cô ấy qua đời. Các tế bào này được đánh giá như tế bào ung thư, cũng chính vì được cách tân và phát triển từ một mẫu mã sinh thiết mang từ phần dưới cổ tử cung bị tổn thương vì ung thư, chủng loại này được kéo ra với mục đích chẩn đoán ung thư. Bất đồng quan điểm vẫn ra mắt trong câu hỏi phân một số loại tế bào này.

Tế bào HeLa, giống như các loại tế bào khác, được coi là dòng tế bào “bất tử” theo tức là chúng hoàn toàn có thể phân chia giới hạn max trong quá trình nuôi cấy tế bào trong phòng phân tách khi bảo đảm an toàn điều kiện cơ phiên bản cho tế bào sinh sống (tức là gia hạn ổn định trong môi trường nuôi phù hợp). Có nhiều chủng tế bào HeLa bởi vì chúng liên tiếp bị hốt nhiên biến trong điều kiện nuôi cấy, nhưng toàn bộ các chủng tế bào HeLa đều phải có cùng nguồn gốc từ một các loại mẫu tế bào khối u đã bị loại bỏ ra khỏi cơ thể Lacks. Tổng số những tế bào HeLa được nhân lên trong điều kiện nuôi ghép phòng thí nghiệm lớn hơn tương đối nhiều tổng số tế bào trong khung người Henrietta Lacks.

2. Ứng dụng trong nghiên cứu

Tế bào HeLa được sử dụng bởi Jonas Salk để thử nghiệm vacxin bại liệt trước tiên vào trong thời gian 1950. Họ quan gần kề thấy rằng tế bào HeLa rất dễ dàng bị lây truyền virus bại liệt, khiến cho tế bào chết. Điều này để cho tế bào HeLa trở đề xuất rất phù hợp để thí điểm vacxin bại liệt khi mà rất có thể dễ dàng thu nhận ra kết quả. Một lượng mập tế bào HeLa đề nghị cho xem sét vacxin bại liệt của Salk, để cho Tổ chức nước nhà chữa bệnh dịch bại liệt (NFIP) nên tìm một phương pháp hiệu quả để rất có thể sản xuất con số lớn tế bào HeLa. Vào mùa xuân năm 1953, một nhà máy sản xuất nuôi cấy tế bào được thành lập tại trường Đại học Tuskegee để hỗ trợ tế bào HeLa đến Salk và những phòng thí điểm khác. Trong tầm gần 1 năm sau, vacxin bại liệt vày Salk điều chế đã rất có thể sẵn sàng hoàn toàn có thể thử nghiệm bên trên người.

Xem thêm: Sản Dịch Sau Sinh: Khi Nào Hết Sản Dịch Sau Sinh, Mất Bao Lâu Thì Hết Sản Dịch Sau Khi Sinh

Tế bào HeLa cũng thuộc dòng tế bào người đầu tiên được nhân dòng thành công năm 1955 do Theodore Puck với Philip I Marcus trên trường Đại học tập Colorado, Denver. Kể từ đó, tế bào HeLa được sử dụng cho các “các phân tích về ung thư, AIDS, ảnh hưởng của phóng xạ và những chất tất cả độc tính, bạn dạng đồ gen với vô số các mục đích nghiên cứu khác”. Theo tác giả Rebecca Skloot, cho tới năm 2009, “có hơn 60,000 bài xích báo kỹ thuật được ra mắt là các nghiên cứu đã được triển khai trên tế bào HeLa, và con số bài đã tạo thêm một cách định hình với tỉ lệ trên 300 bài báo từng tháng.”

Tế bào HeLa được sử dụng trong các thí nghiệm khám phá cơ chế nhưng virus bại liệt khiến nhiễm vào người, tế bào HeLa, chó với mèo. Các tế bào HeLa cũng khá được sử dụng để phân tích các một số loại virus như Oropouche vi khuẩn (OROV). Virut OROV gây gián đoạn hoạt động của tế bào nuôi cấy, những tế bào bước đầu bị thoái hóa nhanh chóng sau khi chúng bị nhiễm virus, để cho chúng tự bị tiêu diệt theo chương trình. Tế bào HeLa được áp dụng để phân tích sự thể hiện của papillomavirus E2 (khung phát âm mở E2 của vi khuẩn gây bệnh dịch sùi mào con gà ở người) và quá trình chết theo chương trình. Chúng cũng được dùng để nghiên cứu năng lực kích hoạt bị tiêu diệt theo chương trình cho các dòng tế bào ung thư của virut canine distemper (gây bệnh Carré), nghiên cứu và phân tích này có thể đóng vai trò quan trọng đặc biệt trong câu hỏi phát triển phương pháp điều trị những tế bào khối u đã phòng lại phương thức hóa trị cùng xạ trị. Tế bào HeLa cũng khá được sử dụng trong một số trong những nghiên cứu giúp về ung thư, bao hàm các nghiên cứu và phân tích liên quan cho hormone giới tính steroid như Estradiol, estrogen và những thụ thể estrogen, thuộc với các hợp chất giống cùng với estrogen, ví dụ như Quercetin và các đặc tính làm bớt ung thư của nó. đã và đang có các nghiên cứu về ảnh hưởng của flavonoids và hóa học chống lão hóa với estradiol lên kĩ năng tăng sinh tế bào ung thư. Tế bào HeLa được áp dụng để kiểm tra các hoạt tính của các hợp chất có nguồn gốc thực thiết bị và cách thức chống ung thư của dịch chiết tất cả tính đụng thu từ bỏ vỏ xoài (EEMP). EEMP được phát hiện tại là chứa không hề ít các hợp hóa học phenol và chúng kích hoạt sự chết cho tế bào ung thư cổ tử cung ác tính HeLa qua tuyến đường chết theo chương trình, điều này cũng cho thấy rằng EEMP có chức năng ngăn dự phòng ung thư cổ tử cung và những loại ung thư khác.

Năm 2011, tế bào HeLa được sử dụng trong test nghiệm chất nhuộm bắt đầu là heptamethine IR-808 và các chất nhuộm tương tự như khác, vừa mới đây người ta khám phá ra bài toán sử dụng những chất nhuộm này trong số chẩn đoán y khoa,phát triển chẩn đoán khám chữa (theranostics) là cách thức điều trị theo từng thành viên bệnh nhân ung thư cùng với sự cung ứng của biện pháp quang động (Photodynamic Therapy – PDT), thuộc kết phù hợp với các phương thuốc khác và xạ trị. Tế bào HeLa được thực hiện trong các nghiên cứu liên quan tiền tới các phân tử carbon (fullerenes) để kích hoạt quy trình chết theo chương trình như 1 phần của liệu pháp quang động, tương tự như để nghiên cứu ung thư thông qua nghiên cứu các dòng tế bào nuôi cấy. Hơn nữa, tế bào HeLa cũng rất được sử dụng để khẳng định các dấu chuẩn ung thư ARN, cùng để tùy chỉnh Hệ thống thừa nhận diện nhờ vào ARNi với Sự can thiệp của những tế bào ung thư sệt hiệu.

3. Phân tích

Telomerase

Dòng tế bào HeLa được cải cách và phát triển cho mục đích phân tích ung thư. Các tế bào này tăng sinh lập cập lạ thường thậm chí là khi đối chiếu với những dòng tế bào ung thư khác. Cũng giống như các loại tế bào ung thư khác, tế bào HeLa tất cả một dạng buổi giao lưu của enzyme telomerase trong quá trình phân chia tế bào, điều đó ngăn chặn bài toán bị làm ngắn lại của đầu telomere nhưng mà đó là nguyên nhân gây ra quá trình lão hóa và ở đầu cuối là chết tế bào. Bằng cách này, các tế bào ung thư tránh được giới hạn Hayflick, là vấn đề giới hạn số lần tế bào phân chia mà hầu như tế bào trải qua trước lúc trở nênlãohóa.

Số lượng nhiễm sắc thể

Chuyển gene ngang (Horizontal gene transfer)từ papillomavirus 18 (HPV 18) vào tế bào cổ tử cung tín đồ đã tạo ra hệ gen của tế bào HeLa, hệ gene này không giống với hệ ren của Henrietta Lacks ở các điểm không giống nhau, trong các số đó có con số nhiễm sắc đẹp thể. Tế bào HeLa được coi là dòng tế bào ung thư phân chia rất nhanh, và số lượng bộ nhiễm sắc thể biến hóa trong quá trình hình thành ung thư cũng như nuôi cấy tế bào trong phòng thí nghiệm. Ước lượng bây giờ (loại trừ đi những mảnh hết sức nhỏ) rằng“số lượng nhiễm sắc thể lớn hơn thể tam bội (3n+)” tức là 76 tới 80 tổng số những nhiễm sắc đẹp thể (nhiều hơn thể bội nhiễm thông thường là 46) với 22-25 những nhiễm nhan sắc thể nhân lên bất thường, chúng được hotline là những nhiễm dung nhan thể phân biệt tế bào HeLa. Những nhiễm dung nhan thể này có thể bắt nguồn xuất phát điểm từ 1 vài các nhiễm thể ban đầu, vấn đề này gâykhó khăn mang đến nhà phân tích khi đếm tổng số NST dựa trên số lượng ban đầu. Những nhà nghiên cứu cũng đã xem xét về sự tồn tại tương đối ổn định của các kiểu nhiễm sắc thể khác hoàn toàn này.

Human papillomaviruses (HPVs) thường chèn vào ADN của tế bào trong ung thư cổ tử cung. Họ đã tìm kiếm được năm địa chỉ chèn vào của virut HPVs bằng phương pháp lai huỳnh quang tại vị trí (FISH): bố vị trí trên nhiễm nhan sắc thể số 8 trên 8q24 với hai địa điểm khác trên những nhiễm dung nhan thể phát sinh có nguồn gốc từ nhiễm dung nhan thể 8q24 là der(5)t(5;22;8)(q11;q11q13;q24) và der(22)t(8;22)(q24;q13). Số lượng bản copy của 8q24 gia tăng được phát hiện nay bởi phương pháp lai so sánh hệ gen – CGH. Lai huỳnh quang tại vị trí hai color với đầu dò c-MYC chỉ ra vị trí của 8q24 trên phiên bản đồ ren và những vị trí nhưng HPV18 chèn vào, cho biết rằng câu hỏi phân tán với khuếch đại của trình tự ren c-MYC xẩy ra ngay sau khi chèn và phần nhiều được kích hoạt bởi câu hỏi chèn vào của virus trên một vị trí. Sự xô lệch về số lượng cũng như cấu tạo nhiễm nhan sắc thể được xác minh bởi phương thức SKY (quang phổ nhiễm sắc thể), sự mất thăng bằng hệ gen được phát hiện bởi phương pháp CGH, áp dụng lai FISH trong vấn đề xác xác định trí chèn vào của HPV18 trên locus c-MYC vào tế bào HeLa là những điểm lưu ý phổ đổi thay và đặc thù cho tiến trình sơ khai sản xuất khối u (advanced stage) của tế bào ung thư cổ tử cung ác tính. Hệ gene của tế bào HeLa hơi là định hình sau vài năm ủ bệnh, chính vì vậy các đổi khác di truyền rất có thể được phát hiện trong những khối u nguyên phát cùng phản ánh các biến cố tương quan trực tiếp cho tới sự phát triển của ung thư cổ tử cung.

Giải trình từ tổng thể hệ gen

Toàn bộ hệ gene của tế bào HeLa được giải trình trường đoản cú và chào làng vào ngày 11 mon 3 năm trước đó mà không tồn tại sự thông báo tới mái ấm gia đình của Lacks. Sự lo ngại về quyền riêng tư từ mái ấm gia đình Lacks đã có được nêu lên chính vì như vậy các người sáng tác tình nguyện giữ kín đáo quyền truy cập vào dữ liệu trình từ hệ gen. Jay Shendure đứng đầu dự án công trình giải trình tự gene tế bào HeLa tại trường Đại học Washington đã trình ra một bài báo cơ mà được chấp nhận công bố vào tháng 3 năm 2013 – nhưng bài xích đó bị bảo quản khi những mối lo lắng về quyền riêng tư của gia đình Lacks được giải quyết. Vào ngày 7 mon 8 năm 2013, chủ tịch của NIH – Francis Collins thông báo rằng một cơ chế về kiểm soát điều hành việc truy vấn tới hệ ren của mẫu tế bào này phải dựa trên sự tuyệt nhất trí sau cha lần họp mặt trao đổi với mái ấm gia đình Lacks. Một Ủy ban truy cập dữ liệu đang xem xét những yêu ước từ những nhà nghiên cứu và phân tích về việc truy vấn trình từ hệ ren với tiêu chí rằng nghiên cứu và phân tích đó buộc phải thuộc về nghiên cứu y học và người sử dụng sẽ phải tuân thủ các lao lý trong bản Cam kết Sử dụng dữ liệu Hệ gene HeLa, bao hàm việc toàn bộ các nhà nghiên cứu được tài trợ bởi vì NIH sẽ buộc phải đưa lại tài liệu ở dạng cơ sở tài liệu duy nhất đến việc share trong tương lai. Ủy ban bao gồm sáu thành viên là các thay mặt đại diện thuộc các lĩnh vực y học, khoa học và đạo đức sinh học cùng hai thành viên trong mái ấm gia đình Lacks. Vào một cuộc bỏng vấn, Collins mệnh danh thiện chí của gia đình Lacks khi đề xuất tham gia vào một trong những tình cảnh không mong muốn này. Ông ấy nói rằng toàn bộ trải nghiệm này “có tác động ảnh hưởng rất táo bạo mẽ” cho tới họ, rằng điều ấy mang lại cùng dịp “sự thân thiện về khoa học, lịch sử hào hùng và đạo đức” theo một cách độc đáo.

Sự nhiễm chéo

Tế bào HeLa nhiều lúc rất khó kiểm soát điều hành vì chúng thích nghi nhanh để sinh trưởng trong số đĩa nuôi cấy. Chúng cải cách và phát triển mạnh như một một số loại “cỏ dại” chắc chắn trong chống thí nghiệm với dễ nhiễm chéo vào những dòng tế bào không giống trong cùng một phòng nuôi cấy, gây tác động ảnh hưởng tới nghiên cứu và phân tích khoa học cùng buộc các phân tích viên phải ra mắt nhiều kết quả không có giá trị. Cường độ nhiễm chéo của tế bào HeLa giữa những dòng tế bào khác chưa được làm rõ vì không nhiều có nghiên cứu và phân tích nào đánh giá danh tính cũng như độ tinh sạch của các dòng tế bào đã được hội chứng nhận. Những bằng chứng cho thấy một tỉ lệ lớn những dòng tế bào nuôi cấyin vitrođã bị nhiễm chéo cánh với tế bào HeLa, ước tính trong vòng từ 10% cho 20%. Stanley Gartler (1967) với Walter Nelson-Rees (1957) là những người đầu tiên chào làng về sự nhiễm chéo của tế bào HeLa lên các dòng tế bào khác.

Tác giả khoa học Michael Gold sẽ viết về vụ việc nhiễm chéo tế bào HeLa trong sách của ông:Âm mưu của những Tế bào(A Conspiracy of Cells).Ông diễn tả nhận định của Nelson-Rees về vấn đề phổ biến toàn mong này – vụ việc nhiễm chéo đã gây ảnh hưởng thậm chí tới cả những phòng thí nghiệm của những nhà khoa học, y học và nghiên cứu và phân tích viên xuất sắc nhất, bao hàm cả Jonas Salk – cùng cần tương đối nhiều nỗ lực ở phần cuối của sự nghiệp của họ để có thể giải quyết nó. Theo như Gold, vấn đề nhiễm chéo cánh tế bào HeLa đã gần như dẫn tới cuộc chiến tranh Lạnh. Thay vị học triệu tập vào giải quyết và xử lý vấn đề nhiễm chéo cánh tế bào HeLa, không hề ít nhà khoa học và tác giả tiếp tục dẫn chứng tài liệu rằng vấn đề này chỉ đơn giản dễ dàng là vấn đề nhiễm chéo – rằng nguyên nhân không phải do lỗi lầm giỏi thiếu sót của con bạn mà là do bản chất bền vững, kĩ năng tăng sinh dũng mạnh và công năng mãnh liệt của tế bào HeLa.

Dữ liệu cách đây không lâu cho thấy rằng nhiễm chéo vẫn đang là một vấn đề đang diễn ra trong điều kiện nuôi cấy tế bào hiện nay đại. Dẫn trực tiếp từ website của Ủy ban xác thực Dòng tế bào thế giới (ICLAC):

Thật không mong muốn rằng nhiễm chéo cánh và định dạng sai tế bào vẫn còn phổ cập trong cộng đồng nghiên cứu vớt khoa học. Không ít dòng tế bào bị nhiễm chéo ngay trong quá trình hình thành dòng; điều này tức là tất cả những công trình khoa học đã lầm lẫn sử dụng những tế bào nhiễm chéo cánh mà chúng có nguồn gốc từ một loài khác hoặc một loại mô khác. Một dòng tế bào bị coi là định dạng sai nếu nó không hề tương đồng với thành viên mà từ kia nó được hình thành. Có không ít trường hợp không mong muốn khi dự án công trình nghiên cứu không có giá trị chỉ vì nhiễm chéo cánh với một cái tế bào khác sinh trưởng to gan lớn mật hơn.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *

  • Dầu gội palmolive gây ung thư

  • Thầy tuệ hải chữa ung thư

  • Bưởi có chất gây ung thư

  • Thầy lang chữa ung thư ở vĩnh phúc

  • x

    Welcome Back!

    Login to your account below

    Retrieve your password

    Please enter your username or email address to reset your password.